Eskerrik asko Nature.com bisitatzeagatik.Erabiltzen ari zaren arakatzailearen bertsioak CSS laguntza mugatua du.Esperientzia onena lortzeko, eguneratutako arakatzailea erabiltzea gomendatzen dugu (edo Internet Explorer-en bateragarritasun modua desgaitzea).Bitartean, laguntza etengabea bermatzeko, gunea estilorik eta JavaScript gabe errendatuko dugu.
Estres post-traumatikoa (PTSD) traumarekin lotutako seinaleei beldur-erantzunak neutralizatzeko gaitasunaren urritasuna du ezaugarri.Gizaki eta animalien ikerketek aurrealdeko kortexaren zenbait eremuren inplikazioan desberdintasunak adierazten dituzte beldurra kentzearen arrakasta zehazten duten bitartekari nagusi gisa, baina eremu horien inplikazio diferentziala zehazten duten neurona-zirkuituen elkarreragina ez dago argi.Desagertze-gogorapenean banakako desberdintasunak nola islatzen diren neurona-zirkuitu-jardueraren desberdintasunetan hobeto ulertzeko, arratoi-kortex sublimbikoko (IL) proiekzioak markatzaile atzerakoiekin etiketatu ditugu eta IL proiekzioko neuronen barruko eta kanpo-proiekzio neuronalak alderatu ditugu.Datu hauek aztertu ditugu, arratoietan lausotutako memoriaren kontserbazio-mailaren arabera taldekatuz.IL-proiektatzen duten zeluletan, atzeko paratalamoko neuronek arratoietan jarduera handiagoa erakusten zutela ikusi genuen, eta horrek iraungitze-gogorapen ona erakusten zuen.IL-proiektatzen duten zelulez gain, Fos jarduera areagotua ikusi zen arratoiaren klaustroaren eta hipokanpo bentraleko eremu hautatuetan bereizmen onarekin.Gure emaitzek adierazten dute iraungitze-gogorapenean dauden desberdintasunak IL proiekzioen barruan eta kanpoan jarduera neuronalaren eredu espezifikoekin lotuta daudela.
Beldurraren baldintzapena estimulu neutro bat baldintzatu gabeko estimulu abertsibo batekin (UCS) lotzen denean gertatzen da, hala nola, jatorriz neutroa den estimulua, gaur egun estimulu baldintzatua (CS), beldurraren erantzun baldintzatua (CR) sortzen du UCSrik ezean.Baldintzatutako beldurra iraultzea CR-n CS-ra jaitsi egin zen UCS1 ezean CS behin eta berriz aurkezteagatik.Aurretik egindako ikerketek erakutsi dute estres post-traumatikoa (PTSD) baldintzatutako beldur-erantzunen desagerpena gogoratzeko ezintasunarekin lotuta dagoela2.Estres post-traumatikoa tratatzeko jokabide-terapia kognitiboaren oinarria esposizio-terapia da ikasitako beldur-erantzunak desagertzean oinarrituta3,4.Hori dela eta, karraskarien desagerpenaren beldurraren eta azpian dauden mekanismo neuronalen banakako desberdintasunen azterketek trauma eta trauma osteko estresaren tratamenduan giza erantzunen desberdintasunak argitzen lagun dezakete.Arrakastatsuak ez diren desagerpen-memoriak bereizten dituzten neurona-mekanismoak identifikatzen aurrera egin arren, asko dago oraindik ezagutzeko.
Karraskarien ereduak erabilgarriak dira lan honetan, karraskarien desagerpena gogoratzean banakako desberdintasun handiak daudelako7,8,9,10.Biztanleria mailan beldurra desagertzeko mekanismo neuronalak ikertzen dituzten aurreko lanek erakutsi dute desagertzeko gogorarazteko kortex infralibikoaren (IL) aktibazioa beharrezkoa dela (11, 12, 13 erref., baina ikus 14), eta zenbait ikerketek aurkitu dute gutxitzea. IL-n karraskarien jarduerak desagertzeari buruzko memoria eskasa erakusten du karraskariekin alderatuta, oso beldur direnak.Hala eta guztiz ere, ez dago argi IL-ek karraskariengan beldurra ezabatzeko modu ezberdinean parte hartzen duten mekanismoak desagertze ahulagoa erakusten dutenekin alderatuta.
Aukera bat da gizabanakoen arteko beldurra desagertzeko memorian dauden desberdintasunak IL aferente espezifikoen aktibazio diferentzialaren ondorio direla.Azterketa anatomikoek18 frogatu dute garuneko hainbat eremu kortikalak eta azpikortikalak proiekzio trinkoak bidaltzen dituztela ILra, eta horrek, aldi berean, proiekzio eferenteak bidaltzen dituela garuneko eremu askotara.Populazio-mailako ikerketek erakutsi dute amigdalarekiko IL proiekzioak garrantzitsuak direla beldurra desagertzeko20,21,22 eta amigdala basolateralaren (BLA) IL sarrera ere desagerpenaren ikaskuntzarekin lotuta dago.Ikerkuntza gutxiago dago IL-en zentratutako zirkuituek iraungitze-gogorapenean duten parte-hartzeari buruz, nahiz eta azken lanek iradokitzen duten hipokanpo bentrala zein dortsala IL iragarpenean parte hartzen dutela.IL-aren proiekzio eferenteek talamoaren nukleo birkonbinatzailearekiko, itxuraz, beldurra desagertzearen memorian ere parte hartzen dute.
Aurreko ikerketa hauek desagertze-gogorapenean parte hartzen duten neurona-zirkuituen elkarrekintzaren irudia margotzen hasi dira, baina oso datu gutxi daude IL-zentratutako neurona-zirkuituetako jarduerak itzaltze-gogorapenean desberdintasun indibidualetan eragiten duen ala ez jakiteko.Hemen, gizabanakoen arteko beldurra desagertzeko memorian dauden desberdintasunak garuneko eskualde espezifikoetan IL sarreraren aktibazioan aldaketekin lotuta dauden ala ez zehaztu nahi izan dugu.Bereziki, IL zelula aferenteen aktibazioa baloratu dugu talamoaren (PVT), klabikula (CLA), BLA eta hipokanpo bentralean (vHPC) nukleo parabentrikularrean.Garun-eskualde hauek aukeratu ziren bai ILra proiekzio trinkoak bidaltzen dituztelako, bai beldurra desagertzearen adierazpenean parte har dezaketela susmatzeko arrazoia dagoelako 18 .Esaterako, azken ikerketa batek erakutsi zuen PVT, beldurra eskuratzean eta ugalketan parte hartzen duen eskualdea, desagertzeko ugalketa beharrezkoa dela.Gainera, aurreko ikerketek amigdala basalaren eta vHPCren jarduera areagotu egin dute desagertzeko memoria adierazten duten arratoietan.Azkenik, klaustroaren analisia esploratzaileagoa da, aurreko lanetako batek ere ez duela desagertzean duen zeregina baloratu.Hala ere, azken lanek beldurraren testuinguruaren baldintzapenean zeresana duela iradokitzen dute29.
GFP-rekin konjugatutako aztarna atzerakoi biralak arratoien IL-an injektatu ziren portaera-probak egin baino lehen, eta Fos-aren jarduera IL aferenteetan neurtu zen desagertze-erreprodukzioan, beldurra gogoratzean eta portaera-probak jasan ez zituzten arratoietan.Gure emaitzek adierazten dute atzeko talamo parabentrikularretik ILra egindako proiekzioek desagertzea arrakastaz gogoratzen duten arratoietan jarduera handiagoa erakusten dutela.IL iragarpenez gain, klabikulako eta hipokanpo bentraleko zenbait gunetan jarduera neuronalak areagotu egin ziren ondo atzera egin zuten arratoietan.Gure emaitzek erakusten dute IL-n proiektatzen diren jarduera neuronal intrintseko eta kanpoko ereduak beldurra desagertzeko memorian banakako desberdintasunekin lotuta daudela.
Charles River Laborategietan (Raleigh, NC) lortutako 54 ar helduen Sprague-Dawley arratoi (300-325 g iristean) erabili ziren gai gisa.Arratoiak binaka egon ziren, janaria eta ura doan sartzeko, 12 orduko argi/ilun zikloan (argiak 07:00etan).Esperimentu hauetarako bi arratoi talde (n = 28 eta n = 26) erabili ziren.Heriotza, akats kirurgikoa, xede gunean GFP adierazpen eza, ehunen kalitate eskasa eta jokabide-arazoak (Metodoetan azaldutakoak) baztertu ondoren, desagertzeko gogorarazteko taldeak 21 arratoi zituen eta beldurra gogoratzeko taldeak 7 arratoi, etxeko kaiola barne.taldea 7 arratoiz osatuta zegoen (35 arratoi sartu ziren azken analisian).Prozedura guztiak Stony Brook Unibertsitateko Animalien Zainketa eta Erabilera Instituzionaleko Batzordeak onartu zituen eta ARRIVE Gidalerroekin (https://arriveguidelines.org) eta Laborategiko Animaliak Zaintzeko eta Erabilerako NIH Jarraibideekin bat etorri ziren.
Arratoiak ebakuntza baino bi egun lehenago tratatu zituzten.Arratoiak ketamina (87 mg/kg) eta xilazina (10 mg/kg) anestesiatu zituzten, aparatu estereotaxiko batean (Stoelting, Woodale, IL) jarri eta AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) IL-n aldebakarreko injekzioak jaso zituzten.(ezkerreko eta eskuineko injekzioak orekatu).Injekziorako, 22 galgako kanula bat jaitsi zen (AP: + 3.00, ML: ± 0.6, DV: - 5.2).Sartu 28G barruko kanula bat (PE 20 hodiaren bidez infusio-ponpa batera konektatuta) gida-kanula barruan 0,6 µl birus emateko minutuko 0,15 µl-ko abiaduran eta utzi infusioa osorik egon ondoren 5 minutuz..Jositu ostean, arratoiei meloxicam (1 mg/kg) injektatu zieten eta mugitu ahal izan bezain pronto kaioletara itzultzen ziren.Arratoiak 7 aste inguru eduki zituzten kaioletan birusa berreskuratzeko eta atzerako garraioa ahalbidetzeko.Hiru arratoi anestesiapean hil ziren, eta ondorioz 51 arratoi (% 94) kirurgiatik arrakastaz sendatu ziren.
Prozedura guztiak 32 cm × 25 cm × 21 cm girotzeko ganberetan egin ziren (Clever Systems Inc., Reston, VA) 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm-ko isolamendu-kutxetan (Clever Sys. Inc.).).Desagertzea ikasteko eta desagertzeko gogoratzeko saioetan, testuingurua aldatu zen jatorrizko baldintzazko testuingurutik ezberdina izateko.A baldintza (beldurraren sorrera) 28 voltioko goritasuneko bonbillak barne hartzen zituen (Chicago Micro Lighting, Erresuma Batua), eta B baldintzak (desagertze-prestakuntza, itzaltzeko proba eta beldurra gogoratzeko proba) LED infragorrien lanparak (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) barne hartzen zituen. ., Txina;U48R).Horrez gain, Context A altzairu herdoilgaitzezko eta plexiglas hormekin dardara-kontrako xafladun zorua duen bitartean, Context B-k margotutako metalezko txertaketak ditu zoruan eta hormetan jarrita.Testuinguruaren B forma ere aldatu egin zen 33,5 cm x 21,3 cm-ko metalezko txertaketa kurbatu bat egokitutako ganbera estandar batean jarriz.Horrez gain, A testuinguruan ganberak % 5 azido azetikoarekin garbitu ziren, B testuinguruan ganberak % 5 amonio hidroxidoarekin.Azkenik, B testuinguruan, arratoiak proba gelara ontzietan sartu ziren gurdietan kaioletan sartu beharrean.Portaera saioak goiko kamerarekin grabatu ziren, eta kamera bakoitzaren bideo-seinalea software batean sartu zen (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA), pixelen aldaketetan oinarritutako desagerpenaren portaera ebaluatzen zuen.Parametroak aukeratu dira, ordenagailuak kalkulatutako desagerpenaren portaera eskuz estimatutako behatzaile trebatuen portaerarekin bat etor dadin.30 segundoko tartean bildutako izozte-denboraren ehunekoa adierazten duen balio bat.
Jokabide-programa guztiak argi/ilun zikloaren argi zatian egiten dira.Arratoiak jokabide-prozedurak hasi baino 5 egun lehenago tratatu eta jokabide-gelara eraman zituzten tratamenduaren azken hiru egunetan.Jokabide-proben lehen egunean, desagertzeko gogorarazteko arratoi talde bat beldurra baldintzatutako erreflexu batean jarri zen, gero A testuinguruan jarri zuten, estimulatu gabeko 6 minutuko aklimatazio-epea emanez, eta, ondoren, 4 kHz, 76 dB, 30 s-ko bi konbinazioak eman zituzten. .tonua eta amaiera orokorra, 1,0 mA, kick 1 s (2 min ITI).Jokabide-entrenamendu guztietarako, arratoiak kaioletara itzuli ziren estimulua azken aurkezpenetik 2 minutura.Hurrengo egunean, desagertze-gogoratze taldeko arratoiak B testuinguruko gelan jarri ziren eta 20 soinu-aurkezpen (2 min ITI) egin zituzten desagertzeko entrenamendu gisa, 6 minutuko ohitura-aldi baten ondoren.Hurrengo egunean, desagertzeko ugalketa taldeko arratoiak B testuinguruan 4 tonuren eraginpean egon ziren 6 minutuko aklimatazio aldi baten ondoren, itzaltze proba gisa.Desagertzeko memoria taldeko arratoiak jokabide-saiotik 60 minutura perfusatu ziren.Beldurraren oroitzapenak sorrarazten zituzten kontrol-arratoi talde bati A testuinguruan beldurra baldintzatutako erantzunaren lehen egunean prozedura bera jasan zuten. Berrogeita zortzi ordu geroago, arratoiak B testuinguruko gelan jarri zituzten eta 4 audio aurkezpen egin zituzten (2- minutuko ITI) gogoratzeko proba gisa.beldurra 6 minutuko aklimatazio-aldi baten ondoren.Arratoiak jokabide-saiotik 60 minutura perfusatu ziren.Etxeko kontrol-arratoi talde bat esperimentuan zehar bere etxeko kaioletan egon zen eta arratoi esperimentalen egun berean perfusatu ziren.Bi arratoi taldeetako bakoitza bi serietan banatu zen, eta talde bakoitzeko animalien kopurua serieen artean orekatu zen.Beldurraren oroitzapenen taldeko arratoi bat analisitik kanpo geratu zen, ez zuelako beldurra baldintzatzeko zantzurik erakutsi (beldurraren oroitzapenen proban denboraren %15 baino gutxiago izoztea).Ikusi 2A irudia jokabidearen denbora-lerroaren diagrama bat ikusteko.
Arratoiak Fatal Plus soluzioarekin (100 mg/kg) gaindosi egin ziren, ondoren %10eko PBS izotzez perfusatu eta, ondoren, %10eko formalina tamponatuarekin.Garuna kendu eta % 30eko sakarosa disoluzio batean gorde zen 4 ° C-tan formalinan astebetez.Ondoren, garuna izoztu eta 40 µm-ko lodierako kriostato batean moztu zen.Atalak sekuentzialki gorde ziren % 10eko PBSn 4 ° C-tan.Ondoren, immunofluoreszentzia egin zen interesgarri zen garuneko eskualdea zuten flotatzaile libreko ataletan.Atalak 3 aldiz garbitu ziren % 10eko PBStan 5 minutuz.Ondoren, atalak ahuntz-serum normalaren %5eko soluzio blokeoan inkubatu ziren 2 orduz giro-tenperaturan, eta, ondoren, hiru aldiz gehiago garbitu ziren 5 minutuz bakoitza %10eko PBStan.Ondoren, atalak gau osoan inkubatu ziren 4° C-tan antigorputz primarioetan (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) % 1 BSAn diluituta PBS % 10ean.Hurrengo egunean, atalak % 10eko PBSn garbitu ziren 30 minutuz 4 ° C-tan, gero 3 aldiz 5 minutuz % 10eko PBSn eta bigarren mailako antigorputz batekin inkubatu ziren (Alexa Fluor 594 ahuntz-untxiaren aurkakoa, konjugatu gorria, 1:500). ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) giro-tenperaturan 2 orduz.5 minutuz % 10eko PBSn 3 garbiketa gehigarri egin ondoren, atalak beirazko diapositibetan jarri eta Fluoromount-G-rekin (Invitrogen) zigilatu ziren.Ikusi immunostaining-aren irudi adierazgarriak 3G irudian.
Infinity3 kamera digital bat (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) eta Zeiss mikroskopio bati konektatutako argi-motor bat (Lumencor, Beaverton, OR) erabiliz mikroskopio fluoreszente bat erabili zen garuneko interesa duen eskualde bakoitzeko irudiak eskuratzeko, atalak barne. IL immunofluoreszentziarik gabe.injekzio-gunearen kokapen zuzena baieztatzeko egiten da.Zelulak zenbatzeko erabilitako irudiak 20x handitzean lortu ziren.Ehun-atal bakoitzeko, hartu irudi bat GFP bistaratzea ahalbidetzen duen iragazki batekin eta irudi bat Alexa Fluor gorri konjokatua bigarren mailako antigorputzetan bistaratzea ahalbidetzen duen iragazki batekin, eta irudirako softwarea (Infinity Analyse, 3. bertsioa) erabili zen. gainjarri.Lortu garuneko eremu guztietako irudi guztiak esposizio-denbora eta irabazi-ezarpen berdinak erabiliz.Sei arratoi analisitik kanpo geratu ziren birusaren transmisio nagusia ILtik kanpo gertatu zelako (%88ko arrakasta-tasa).Zortzi arratoi gehiago baztertu ziren, birusak IL erasotzen zuen arren, ez baitzuten GFP adierazpen nahikorik erakutsi xede garuneko interes-eskualde guztietan.Horrez gain, arratoi bat baztertu zuten ehunen kalitate txarragatik.
Doitu distira eta kontrastea J irudiko (NIH) hondoko zarata murrizteko, irudi bakoitzaren prozedura bera erabiliz.Etiketatutako zelula atzerakoi guztien, Fos markatutako zelulen guztirako eta etiketa bikoitzeko zelulen guztirako zelulen zenbaketak eskuz egin zituen esperimentatzaileak, eta ez zituen animaliak identifikatu, Image J cytometer plug-in-a erabiliz.Zelula kopurua zelula/mm2-ra normalizatu zen.IL-proiektatzen duten zeluletan Fos adierazpena aztertzeko, etiketa bikoitzeko zelulen kopurua atzerakoi markatutako zelulen kopurura normalizatu zen.mBLA, mvHPC eta pvHPC analisirako, 20x irudi anitzetako zelulen kopuruak batu eta zelula/mm2-tan normalizatu ziren.Garuneko gainerako eskualdeak aztertzeko, 20x irudi bat edo 20x irudi baten zati bat aztertu eta zelula/mm2-tan normalizatu zen.vHPC analisiak CA1, CA2 eta vHPC eskualde azpidominatzaileak barne hartu zituen.1. irudiak planoaren aurreko-atzealdeko ertza zedarritzen duten irudiekin aztertutako garuneko eskualdeak erakusten ditu.
Interesgarri diren garuneko eskualdeen laburdurak eta kokapena.Eskuizkribuan emandako garun-eskualdeen laburduren eta kokapenaren azalpena.Domeinu publikoko garun-mapa Swanson-etik hartua (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, 3. Edizioa, Creative Commons Aitortu-EzKomertziala 4.0 Nazioarteko Lizentziapean (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), deskargatzeko eskuragarri dago https://larrywswanson.com helbidean.
Izozte-denboraren ehunekoa 30 segundoko tonuen erreprodukzio-aldian batez bestekoa da, tarteko tarteak kenduta.Desagertze-gogorapen-tasak desagertze-gogorapenean iraungitze-denboraren ehunekoa desagertzeko lehen 4 entrenamendu-saiakuntzetan zehar desagertzeko portzentaje gisa adieraziz kalkulatu ziren (desagertzeko lau tonu gogoratzeko / desagertzeko lehen lau entrenamendu-tonuetan*100).Puntuazio baxuek desagertze-memoria ona adierazten dute, eta puntuazio altuek desagertze-memoria eskasa adierazten dute.Arratoiak desagertze-gogorapenaren puntuazioaren arabera sailkatu ziren, desagertze-gogoratzearen puntuaren goiko herenean dauden arratoiak "desagertze-arratoi txarrak" gisa sailkatu ziren eta desagertzearen azken bi herenetako arratoiak "onak" gisa sailkatu ziren.Memoria desagertzen ari diren arratoiak.
Proba ez parametrikoak erabiltzen dira datuek sarritan banaketa normalari eta/edo bariantzen homogeneotasunari buruzko hipotesiak urratzen dituztelako.Spearman-en maila-korrelazioa erabili zen desagertze-gogorapenaren puntuazioen eta Fos markatzaileen eta markatzaile bikoitzen artean interesgarri diren garuneko eskualdeetan desagertze-gogorapenaren proban jasandako arratoi guztietan elkartze esanguratsurik zegoen ala ez zehazteko.Mann-Whitney U-testa erabili zen bi talde independenteren artean alderik zegoen ala ez zehazteko.Kruskal-Wallis-en proba erabiltzen da 2 talde edo gehiago elkarrengandik desberdintzen diren zehazteko, eta Dunn-en konparazio anitzeko proba erabiltzen da Kruskal-Wallis estatistikoa esanguratsua denean.Desagertzearen ikaskuntzan zehar desagertzea ebaluatu zen, taldearekin subjektu arteko faktore gisa eta proba subjektu barneko faktore gisa duen bariantza-neurri errepikatuen analisia erabiliz. Emaitzak esanguratsutzat jo ziren p < 0,05 denean proba estatistiko guztientzat. Emaitzak esanguratsutzat jo ziren p < 0,05 denean proba estatistiko guztientzat. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Emaitzak esanguratsutzat jo ziren p < 0,05ean proba estatistiko guztietan.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。 Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Emaitzak esanguratsutzat jo ziren p < 0,05ean proba estatistiko guztietan.
2. Irudiak denbora-lerro esperimentala (2A. Irudia) eta desagertzeko dauden arratoi guztien maiztasun-banaketa erakusten ditu (2B. Irudia). Desagertze onen eta txarraren taldeetako arratoiak nabarmen ezberdin ziren desagertze-gogorapen-puntuazio hauetan (U = 0, p < 0,001) (2C. irudia). Desagertze onen eta txarraren taldeetako arratoiak nabarmen ezberdin ziren desagertze-gogorapen-puntuazio hauetan (U = 0, p < 0,001) (2C. irudia). Крысы в ​​​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим расна расльно минания угашения (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Desagertze onen eta txarraren taldeetako arratoiak nabarmen ezberdin ziren desagertze-tasa kalkulatu hauetan (U=0, p<0,001) (2C irudia).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着存在显着分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着存在显着存在显着分（（（（（（ 0 2C). U = 0，p <0,001）（图2C， В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы в ​​​​группах с хорошим и хорошим хорошим и хорошим и плошения крысы ьно различались (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Kalkulatutako desagerpen-tasa horietan, desagertze-talde onen eta txarrean dauden arratoiak nabarmen desberdinak ziren (U = 0, p < 0,001) (2C irudia).Ez zen desberdintasun handirik egon izozte-denboran desagertze ona, iraungitze txarra eta beldurra gogoratzea beldurra baldintzatutako erreflexu-saioaren oinarrizko aldian (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (2D irudia).Horrez gain, beldurra baldintzatutako erreflexuaren lehen tonua aurkeztean, ez zen alde handirik egon izozte-denboran desagertze ona, desagerpen eskasa eta beldurra gogoratzea duten taldeen artean (X2(2) = 1,107, p = 0,575), izan ere. baita beldurrean ere bigarren tonuetan zehar.Girotze-saioan, izozte-denboran alde nabarmena egon zen desagerpen ona, desagerpen eskasa eta beldurra gogoratzen zuten taldeen artean (X2(2) = 2.214, p = 0.331) (2D irudia).Desagertze-talde onen eta txarraren artean ere ez zen alde handirik egon desagertze-denboran oinarrizko desagertze-prestakuntza-aldian (U = 45,00, p = 0,799) (2D irudia). Ondoren, proba-blokearen (5 tono bloke bakoitzeko) efektu nagusi esanguratsua izan zen desagertzeko entrenamendu-saioan izoztuta igarotako denboran (F (2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), desagertzeko ikaskuntza gertatu zela adieraziz (2D. irudia). ). Ondoren, proba-blokearen (5 tono bloke bakoitzeko) efektu nagusi esanguratsua izan zen desagertzeko entrenamendu-saioan izoztuta igarotako denboran (F (2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), desagertzeko ikaskuntza gertatu zela adieraziz (2D. irudia). ). Затем наблюдался значительный зновной эффект пробного блока (5 тонов на блок) На Время, затрачиваемое на замирание во время Тренировки угашения (F (2.884, 54,80) = 8,331, P <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( рис. Orduan, proba-blokearen (5 tono bloke bakoitzeko) eragin nagusi esanguratsua izan zen desagertzeko prestakuntzan izozteko denboran (F(2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), desagertzeko ikaskuntza gertatzen ari zela adierazten zuen (Irudia). 2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主（F48.（）（）（（），，） 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） 。接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主（F48.（）（）（（），，） 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） 。 Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значитению значитено в начитен в на блок мя замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашение угашению (присодию) 2D). Ondoren, desagerpenaren ikaskuntzan, proba-blokeek (5 tono bloke bakoitzeko) eragin nagusi nabarmena izan zuten desagertze-denboran (F(2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), itzaltze-ikaskuntza gertatzen ari zela adieraziz (2D. irudia). .Hala ere, desagertze-taldeak (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) ez zuen eragin handirik izan desagertzeko entrenamendu-aldi osoan zehar desagertze-denboran, eta ez zen interakziorik egon proba-blokearen eta itzaltze-taldearen artean (F(4). , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (2D irudia). Proba saioan zehar, desberdintasun handia egon zen desagertze onaren, desagerpen txarraren eta beldurra gogoratzeko taldeen artean, oinarrizko aldian izoztuta igarotako denboran (X2 (2) = 8.569, p = 0.014), eta horrela beldurra gogoratzeko taldea nabarmen izoztu zen. desagertze-talde onak baino gehiago (Batezbesteko Rank Dif. = 10,57, p = 0,017), baina ez desagertze talde eskasa (Mean Rank Diff. = − 3,714, p > 0,999) (2D. irudia). Proba saioan zehar, desberdintasun handia egon zen desagertze onaren, desagerpen txarraren eta beldurra gogoratzeko taldeen artean, oinarrizko aldian izoztuta igarotako denboran (X2 (2) = 8.569, p = 0.014), eta horrela beldurra gogoratzeko taldea nabarmen izoztu zen. desagertze-talde onak baino gehiago (Batezbesteko Rank Dif. = 10,57, p = 0,017), baina ez desagertze talde eskasa (Mean Rank Diff. = − 3,714, p > 0,999) (2D. irudia).Proba saioan zehar, desberdintasun handia egon zen desagerpen ona, desagertze txarra eta beldurra gogoratzeko taldeen artean, oinarrizko aldian izoztuta igarotako denboran (X2(2) = 8.569, p = 0.014), eta horrela beldurra gogoratzeko taldea izoztu zen. nabarmen .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но ного вымирания средняя разница рангов = -3.714, p> 0.999) (рис. 2D). desagertzeko talde onetan baino handiagoa (batez besteko mailaren aldea = 10,57, p = 0,017) baina ez desagertze txarreko taldean (batez besteko mailaren aldea = -3,714, p > 0,999) (2D irudia).在测试期间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间昹结时间昖坹靨(2) = 8,569，p = 0,014），因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714（p > （2）D） 0,999在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时關 傘退 方间 方间 方间（（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） ， 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差绝组（平均秩差= – 3,714，（99）差，（）（）（）） В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой спой хорусть плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на 2, p. 2, 2 p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не групица средняя разница рангов = 0,017 азница рангов = -3.714, p> 0.999) (рис. 2D). Probaldian zehar, alde nabarmena egon zen desagertze-talde onaren, desagertze-talde eskasaren eta beldurra gogoratzeko taldearen artean, oinarrian izozte-denborari dagokionez (X2(2) = 8.569, p = 0.014), beraz, beldurra gogoratzeko. taldea desagertze ona duen taldea baino nabarmen maizago izozten da (batez besteko maila-aldea = 10,57, p = 0,017), baina ez desagerpen eskasa duen taldea (batez besteko maila-aldea = -3,714, p > 0,999) (2D irudia).Desagertze-talde onak, desagertze-talde txarrak eta beldurra gogoratzeko taldeak ere desagertze-denbora nabarmen desberdinak izan zituzten proba-saioaren tonuaren aurkezpenean (X2(2) = 14,93, p = 0,001), beraz, desagertze-talde onak nabarmen gutxiago izan ditu. denbora.izozte-denbora desagertze-talde ahulean (batez besteko maila-aldea = 9,286, p = 0,044) eta beldur-memoria taldean (batez besteko maila-aldea = 13,86, p = 0,001) (2D. irudia).
Desagertzearen oroitzapenean banakako desberdintasunak.(A) Prozedura kirurgikoen eta portaeraren eskema.(B) Desagertzen diren oroimenaren puntuazioetan banakako desberdintasunak erakusten dituen maiztasun banaketa.(C) Kalkulatutako desagertze-gogorapenaren puntuazioetan oinarrituta diseinatutako taldeek bi fenotipo desberdin adierazten dituztela frogatzen dute.(D) Arratoiak desagerpen txarragatik, desagerpen onagatik eta beldurra gogoratzen duten denboraren batez besteko portzentajea baldintzatutako beldur-erreflexu-saio bateko 30 segundoko zeluletan, 20, 30 s-ko tonuetan, 5 bloketan kolapsatu ziren desagertzeko ikaskuntza-saioan (4 tonu) .bakoitza), eta lau tonutan desagertzearen eta beldurraren oroitzapenen saioetan.Errore-barrak batez bestekoaren desbideratze estandarra adierazten dute. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p <0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001. *p <0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Adierazle atzerakoi bat injektatu zen IL-an (3A. irudia) eta interes-eskualdearen aurreko-atzeko ardatzean zehar GFP+ zelula kopurua zehaztu zen (3B-F. irudia).Alde esanguratsua zegoen GFP+ zelula kopuruan aurreko, erdiko eta atzeko PVTren artean (X2 (2) = 8.200, p = 0.017), beraz, mPVT-k aPVT (batez besteko maila) Diff baino GFP+ zelula nabarmen gehiago erakutsi zuen.= 18,37, p = 0,035) eta pPVT (batez besteko maila Diff. = 17,71, p = 0,045) (3C irudia).Hainbat animaliek pCLAn GFP+ zelularik detektatu ez zuten arren eta, beraz, ezin izan zuten eskualde honetako jarduera mapatu, ez zegoen alde handirik aurreko, erdiko eta atzeko CLAren artean (X2(2) = 5.596, p = 0.061).GFP+ zelula kopurua (3D irudia).Orduan, hainbat arratoitan GFP+ zelula batzuk aBLA edo avHPCn aurkitu zirenez, eremu horien erdialdea eta atzealdea baino ez ziren aztertu.Erdiko eta atzeko BLA (U = 393, p = 0,009) GFP+ zelula kopuruan nabarmen desberdina zen, beraz, pBLAk IL proiekzio gehiago erakutsi zituen mBLAk baino (3E Irudia).Era berean, erdialdeko eta atzeko vHPCen arteko alde nabarmena zegoen, beraz, pvHPCek IL proiekzio gehiago erakutsi zuten mvHPCek baino (U = 403.5, p = 0.014) (3F Irudia).3G irudia Fos, aavRG-GFP eta etiketa bikoitzeko zelulak erakusten dituen irudi eredugarria da.
Kuantifikatu IL aferenteak garuneko interes-eskualde osoan.(A) aavRG-CAG-GFP-ren banaketaren irudikapen eskematikoa arratoi IL osoan.(B) Erretrogradoko markatzaileen irudi adierazgarriak garuneko interes-eskualdearen anteroposterior kokapen desberdinetan.Etiketatze atzerakoiaren kuantifikazioa ardatz anteroposteriorean (C) talamo parabentrikularra, (D) klabikula, (E) amigdal basolaterala eta (F) hipokanpo bentrala.(G) Irudi adierazgarriak aavRG etiketatze atzerakoia, Fos etiketatzea eta aavRG eta Fos etiketa bikoitza erakusten dutenak aPVTn.Errore-barrak batez bestekoaren desbideratze estandarra adierazten dute. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Eskala-barra 100 µm.A paneleko domeinu publikoko garun-mapa Swanson-en (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3. Edizioa, Creative Commons Aitortu-NonCommons 4.0 Nazioarteko Lizentziapean (https://creativecommons.org/licenses/by-nc) erreproduzitu da. )./4.0/) https://larrywswanson.com helbidean deskargatzeko eskuragarri dago.
Fos jarduera globala eta IL proiekzio espezifikoa arratoi guztietan aPVT, mPVT eta pPVT-n aztertu zen.Fos adierazpenean aPVT-n (X2(3) = 3.888, p = 0.274) (4A. irudia) ez zegoen desberdintasun esanguratsurik (X2(3) = 3.888, p = 0.274) (4A. irudia), ezta Fos-en arteko korrelazio esanguratsurik ere. aPVT-n adierazpenaren eta iraungitze-gogoratzearen artean (rs = 0,092, p = 0,691) (4B irudia) edo Fos adierazpenaren artean aPVT IL aferenteetan eta iraungitze-gogorapenaren artean (rs = 0,143, p = 0,537) (4D irudia).Hala ere, aPVT IL aferenteetan, Fos adierazpena nabarmen desberdina zen desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean (X2(3) = 15,05, p = 0,002), beraz, beldurra gogoratzeko taldeak nahiko desagerpen ona erakutsi zuen.erregresioa (batez besteko aldea = 11,54, p = 0,003), erregresio eskasa (batez besteko aldea = 10,57, p = 0,034) eta etxeko zelula (batez besteko aldea = 12,79, p = 0,005) taldeak (4C irudia).Gainera, ez zen desberdintasun handirik egon desagerpen ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean Fos adierazpenerako mPVTn (X2 (3) = 2.272, p = 0.518) (4E. Irudia) eta Fos adierazpenerako mPVTn..Korrelazio esanguratsua desagertzearen gogorapenarekin (rs = 0,168 p = 0,468) (4F irudia).IL mPVT zeluletan Fos adierazpenean onen, txarraren, beldurraren oroimenaren eta etxeko zelula taldeen artean alde esanguratsua egon bazen ere (X2(3) = 9.252, p = 0.026), post hoc konparaketak ez zituen bat edo bi agerian utzi.Taldeen arteko alde esanguratsuak (4G irudia).Gainera, ez zegoen korrelazio esanguratsurik IL-aferentearen mPVT zeluletan Fos adierazpenaren eta desagerpen-gogoratzearen artean (rs = 0,174, p = 0,450) (4H irudia). Ondoren, desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko kaiola taldeen artean Fos adierazpenean pPVT-n (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), desagertze ona den taldea (Mean Rank). Diff. = 14,96, p = 0,010), baina ez desagerpen eskasa (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) edo beldurra gogoratzeko taldeak (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), Fos adierazpen gehiago erakutsi du. etxeko kaiolen taldea (4I. irudia). Ondoren, desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko kaiola taldeen artean Fos adierazpenean pPVT-n (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), desagertze ona den taldea (Mean Rank). Diff. = 14,96, p = 0,010), baina ez desagerpen eskasa (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) edo beldurra gogoratzeko taldeak (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), Fos adierazpen gehiago erakutsi du. etxeko kaiolen taldea (4I. irudia). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плосанием, плосанием, плохтамшо мы между а и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошам с хороешим Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,11 плохого угашения) страхе (средняя ранговая разница = 2.571, p > 0.999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Gainera, desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean Fos adierazpenean pPVT-n (X2(3)=13,89, p=0,003), desagertze talde ona (batez besteko maila Diff. = 14,96, p = 0,010), baina ez desagertze talde eskasean (batez besteko maila-aldea = 12,86, p = 0,113) edo beldur-memoria taldean (batez besteko maila-aldea = 2,571, p > 0,999), Fos adierazpena baino nabarmenagoa izan da. etxeko zelula taldea (4I. irudia).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 （ （ 38 （（ （ 38. p = 0,003） 使得 消组 （（Batezbesteko Rank Difff.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Batez besteko mailaren diferentzia = 12,86, p = 0,113) 或恐惧回忆组(Batezbesteko mailaren diferentzia = 2,86, p = 0,113)笼组（图4I ）。= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Batez besteko mailaren diferentzia = 12,86, p = 0,113) ）。Bigarrenik, pPVT-n Fos espresioan alde esanguratsuak zeuden ona, txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), ingesta ona talde bihurtuz (batez besteko aldea = 14,96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или групению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) ца рангов = 2.571, p > 0.999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), baina ez da okerragoa desagertzean (batez besteko maila-aldea = 12,86, p = 0,113) edo beldurra gogoratzeko taldean (batez besteko maila-aldea = 2,571, p > 0,999) etxeko zelula-taldea baino (4I irudia)..Hala ere, ez zegoen pPVT Fos adierazpenaren eta desagertze-gogoratzearen artean (rs = 0.051, p = 0.825) (4J irudia).Azkenik, Fos adierazpenean alde nabarmena zegoen pPVT IL aferenteetan desagertze ona, desagerpen eskasa, beldurraren oroitzapenak eta etxeko zeluletan (X2(3) = 12,34 p = 0,006), beraz, Fos adierazpen ona IL-n zegoen. desagertze-taldeetan (batez besteko maila-aldea = 12,54, p = 0,014) eta etxeko zeluletan (batez besteko maila-aldea = 12,89, p = 0,049) (4K. irudia) baino okerragoa da eta nabarmen erlazionatuta IL aferenteekin pPVT barruan aktibazioa eta desagertzearen baliogabetzea, desagertze-gogorapen hobea IL aferente horien aktibazio handiagoarekin lotu zen (rs = -0,438, p = 0,047) (4L irudia).
Fos jarduera areagotu egin zen arratoietan atzealdeko talamo parabentrikularraren (PVT) IL aferenteetan, eta horrek erregresio ona erakutsi zuen.(A) Ez zegoen Fos adierazpenean taldeen arteko desberdintasun esanguratsurik aPVTn.(B) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren eta desagertze-gogoratzearen artean aPVTn.(C) Beldurra gogoratzeko taldeak Fos adierazpena handitu zuen IL aferenteetan beste talde guztiekin alderatuta.(D) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren IL aferenteetan eta aPVT-n desagertze-gogoratzearen artean.(E) Ez zegoen taldeen arteko desberdintasun esanguratsurik Fos adierazpenean mPVTn.(F) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren eta desagerpen memoriaren artean mPVTn.(G) Fos adierazpena IL zelula aferenteetan mPVTn ez zen taldeen artean nabarmen desberdina.(H) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren IL aferenteetan eta mPVT-n desagerpen-gogoratzearen artean.(I) Ondo desagertutako talde batek, baina beste talderik ez, Fos jarduera handitu egin zuen pPVT-n etxeko kaiola taldearekin alderatuta.(J) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren eta desagertze-gogoratzearen artean pPVTn.(K) Desagertze talde onak Fos adierazpena areagotu zuen IL zelula aferenteetan desagertze talde ahula eta etxeko zelula taldearekin alderatuta.(L) Korrelazio esanguratsua dago IL aferenteetan Fos adierazpenaren eta desagertze-gogoratzearen artean, beraz, itzaltze-gogorapen ona IL aferenteetan Fos adierazpen handiagoarekin lotzen da.Errore-barrak batez bestekoaren desbideratze estandarra adierazten dute. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Ondoren, arratoien aCLA eta mCLAn Fos jarduera globala eta IL proiekzio espezifikoa aztertu zen talde guztietan. Fos adierazpeneko desagerpen ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko kaiola taldeen artean desberdintasun esanguratsu bat zegoen aCLAn (X2 (3) = 8.455, p = 0.036), horrela beldurra gogoratzeko taldea (Mean Rank Diff. = 14,50, p = 0,049), baina ez pobreek (Batezbesteko Rank Desf. = 10,21, p = 0,373) ez desagertze onek (Mean Rank Diff. = 4,607, p > 0,999) taldeek ez zuten Fos adierazpen gehiago erakutsi etxeko kaiola taldeak baino ( 5A irudia). Fos adierazpeneko desagerpen ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko kaiola taldeen artean desberdintasun esanguratsu bat zegoen aCLAn (X2 (3) = 8.455, p = 0.036), horrela beldurra gogoratzeko taldea (Mean Rank Diff. = 14,50, p = 0,049), baina ez pobreek (Batezbesteko Rank Desf. = 10,21, p = 0,373) ez desagertze onek (Mean Rank Diff. = 4,607, p > 0,999) taldeek ez zuten Fos adierazpen gehiago erakutsi etxeko kaiola taldeak baino ( 5A irudia). Gehiago irakurri уорошим угашением, угашением угашением, припоминанием страха eta домашними клетками наблюдаль раблельная раз Ница в экспрессии fos в Acla (x2 (3) = 8,455, p = 0,036), Так что группп припоминания припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, or = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим выедним выранимя ца = 4.607, p > 0.999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетксии 5А). Desberdintasun handia zegoen aCLA Fos adierazpenean desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean (X2(3) = 8.455, p = 0.036), beraz, beldurra gogoratzeko taldea (batez besteko aldea = 14.50, p). = 0,049), baina ez pobreek (batez besteko maila-aldea = 10,21, p = 0,373) ezta desagertze talde onek (batez besteko maila-aldea = 4,607, p > 0,999) ez zuten Fos adierazpen gehiago erakutsi etxeko zelula-taldeak baino (.5A. irudia) . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着在显着在显着在显着在显着差 (，35) =8.因此恐惧回忆组(Batezbesteko Mailaren Aldea = 14,50，p = 0.049），但无论是差（平均秩差= 10.21，p = 0.373）还是良好灭绝（平均秩差（平均秩差（4.秩，，，，，，，，） 9都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) 。 Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 傮 差异异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (batez bestekoa Rank-diferentzia = 14,50 ， P = P = P = P = P = 14. 0,049 ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 ， p = 373 （缉 绉 0.平均 秩差 秩差 = 4,607 ， p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашеница между группами с хорошим угашением, плохим угашеница между группами с хорошим угашением, плохим угашеница между группами с хорошим угашением леткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее рани 1, p = 0,036) = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) eta с хорошим вымиранием вымиранием = 4 ,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). Desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean desberdintasun esanguratsua zegoen aCLA Fos adierazpenean (X2(3) = 8.455, p = 0.036), beraz, beldurra gogoratzeko taldea (batez besteko aldea = 14.50), p = 0.049. ), baina eskasa (batez besteko maila-aldea = 10,21, p = 0,373) eta desagerpen ona (batez besteko maila-aldea = 4,607, p > 0,999) Fos adierazpen handiagoa erakutsi zuten etxeko zelula-taldeak baino (5A. irudia). .Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpen globalaren (rs = 0.036, p = 0.876) (5B irudia) edo Fos adierazpenaren IL aCLA zelula aferenteetan (rs = -0.282, p = 0.215) eta iraungitze-gogoratzearen (5B irudia)..5D), ez zen desberdintasun handirik egon desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean Fos adierazpenean aCLA IL aferenteetan (X2 (3) = 6.722, p = 0.081) (5C Irudia)..). Ondoren, desagertze ona, desagerpen eskasa, beldurra gogoratzea eta etxeko kaiola taldeen artean Fos adierazpenean mCLAn (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) desagertze talde onak (Mean Rank Diff. . = 12,93, p = 0,038), baina ez desagerpen eskasak (Mean Rank Diff. = 5,143, p > 0,999) ezta beldurra gogoratzeko taldeek (Mean Rank Diff. = 14,00, p = 0,063) Fos adierazpen gehiago erakutsi dute mCLAn etxeko kaiola taldearekiko (5E. irud.). Ondoren, desagertze ona, desagerpen eskasa, beldurra gogoratzea eta etxeko kaiola taldeen artean Fos adierazpenean mCLAn (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) desagertze talde onak (Mean Rank Diff. . = 12,93, p = 0,038), baina ez desagerpen eskasak (Mean Rank Diff. = 5,143, p > 0,999) ezta beldurra gogoratzeko taldeek (Mean Rank Diff. = 14,00, p = 0,063) Fos adierazpen gehiago erakutsi dute mCLAn etxeko kaiola taldearekiko (5E. irud.). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плоенимим, плоенимим, плоенимим, плоеним, плошением о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что групрессии страхе и так что групрессии страхе зница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, Тни группы плохого угашения) раха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos в mCLA. Orduan, desagertze ona, desagerpen txarra, beldur-memorien eta etxeko zelula taldeen artean alde nabarmena zegoen mCLA Fos adierazpenean (X2(3) = 10,12, p = 0,018), beraz, desagertze talde ona (batez besteko diferentzia maila = 12,93, p). = 0,038), baina ez desagertze talde eskasek (batez besteko maila-aldea = 5,143, p > 0,999) ezta beldurra gogoratzeko taldeek (batez besteko maila-aldea = 14,00, p = 0,063) Fos adierazpen nabarmen handiagoa izan mCLAn.etxeko kaiola taldearekin alderatuta (5E irudia).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回 忮 回显着 差异 （x2 （3） = 10,12 ， p = 0,018） ， 良好 （（（（（（ （（（ Batez besteko maila desberdina.= 12,93, p = 0,038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5,143，p > 0,999）和恐惧回忆穮廮回（平均秩差= 5,143，p > 0,999）和恐惧回忆0. ，p = 0,063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 = 12.93, p = 0.038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5.143 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5.143 ， 在 弌 弌 （ 平 ） 0.99均 秩差 = 14,00 ， p = 0,063） 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хороеш группой с хорошош групош групо им угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018, грошней клеткой), им угасанием угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средня рангов = разнаи, 9, но в mCLA) ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клетсунй). Gainera, Fos adierazpenean mCLAn desberdintasun handia zegoen desagertze talde onaren, desagertze talde eskasaren, beldurraren feedback taldearen eta etxeko zelula taldearen artean (X2(3) = 10.12, p = 0.018), beraz, ona. desagertzea (batez besteko mailaren aldea = 12.93, p = 0.038), baina mCLAn ez zen desagerpen ahula (batez besteko mailaren aldea = 5.143, p > 0.999) ezta beldurra gogoratzeko taldea (batez besteko mailaren aldea = 14.00, p = 0.999) = 0.063 hobeto erakutsi. Fos anitzeko adierazpena etxeko zelula taldearekin alderatuta (5E irudia).Hala ere, Fos adierazpen globala mCLAn (rs = 0,321, p = 0,156) (5F. irudia) edo IL mCLA zelula aferenteetan (rs = -0,121, p = 0,602) eta iraungitze-gogora (5H irudia), ez dago alde nabarmenik. desagertze ona, desagerpena txarra, beldurra gogoratzea eta Fos adierazpenerako etxeko zelula bat IL mCLA zelula aferenteetan (X2(3)=4.923, p=0.178) (5G irudia).
Fos jarduera klaustroaren erdialdean igo zen desagertzeko memoria ona zuten arratoietan.(A) Beldurra gogoratzeko taldeak, baina ez beste taldeek, Fos jarduera areagotu zuten aCLAko etxeko zelula taldearekin alderatuta.(B) Ez zegoen Fos adierazpenaren arteko korrelazio esanguratsurik aCLAn eta iraungitze-gogoratzearen artean.(C) IL aCLA zeluletan Fos adierazpena ez zen nabarmen ezberdintzen taldeen artean.(D) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren IL aferenteetan eta aCLAren desagerpen-gogoratzearen artean.(E) Ondo desagertutako taldeak, baina ez beste taldeek, Fos jarduera handitu egin zuten mCLAn etxeko zelula taldearekin alderatuta.(F) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren eta desagerpen-gogoratzearen artean mCLAn.(G) IL mCLA zelula aferenteetan Fos adierazpena ez zen taldeen artean nabarmen ezberdintzen.(H) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren IL aferenteetan eta mCLAn desagertzeko gogoratzearen artean.Errore-barrak batez bestekoaren desbideratze estandarra adierazten dute. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.
Ondoren, mBLA eta pBLAn Fos jarduera globala eta IL proiekzio espezifikoa aztertu zen arratoi talde guztietan.Ez zen desberdintasun handirik egon desagerpen ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean Fos adierazpenean mBLAn (X2(3)=0.944, p=0.815) (6A Irudia).Erregresio ona, erregresio eskasa, beldurra gogoratzea eta etxeko zelulen Fos adierazpena IL mBLA zelula aferenteetan ere ez zegoen alde handirik (X2(3)=0.518, p=0.915) (6C Irudia).Horrez gain, ez zegoen Fos adierazpen globalaren arteko korrelazio esanguratsurik mBLAn (rs = 0,126, p = 0,588) (6B irudia) eta IL mBLA zelula aferenteetan Fos adierazpenaren artean (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p). = 0,385).p = 0,385).6D irudia) eta desagertze-gogora.Fos adierazpenean pBLA-n (X2(3) = 4.246, p = 0.236) (6E. irudia) ere ez zen desberdintasun esanguratsurik egon desagertze onetan, desagerpen txarrean, beldurraren memorian eta etxeko zelula-taldeetan. pBLAn Ona.desagerpena, desagerpen eskasa, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula-taldeak Fos adierazpenean IL zelula aferenteetan (X2(3)=1.954, p=0.582) (6G irudia).Azkenik, Fos adierazpen globala pBLAn (rs = 0,070, p = 0,762) (6F. irudia) eta Fos adierazpena pBLA IL zelula aferenteetan (rs = 0,122, p = 0,597) eta iraungitze-gogorapena (6H irudia).
Desagertzeko erreprodukzioaren desberdintasun indibidualak ez ziren Fos adierazpenaren desberdintasunekin mapatu amigdala basolateralean.(A) Ez zegoen talde arteko desberdintasun esanguratsurik Fos adierazpenean mBLAn.(B) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren eta desagertzearen gogoratzearen artean mBLAn.(C) IL mBLA zelula aferenteetan Fos adierazpena ez zen taldeen artean nabarmen ezberdintzen.(D) Ez zegoen korrelazio esanguratsurik IL zelula aferenteetan Fos adierazpenaren eta mBLA-n desagerpen-gogoratzearen artean.(E) Ez zegoen talde arteko desberdintasun esanguratsurik pBLA-n Fos adierazpenean.(F) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren eta desagertze-gogoratzearen artean pBLAn.(G) IL pBLA zelula aferenteetan Fos adierazpena ez zen nabarmen ezberdintzen taldeen artean.(H) Ez zegoen korrelazio esanguratsurik IL zelula aferenteetan Fos adierazpenaren eta pBLA-n desagertzeko gogoratzearen artean.Errore-barrak batez bestekoaren desbideratze estandarra adierazten dute.
Azkenik, Fos jarduera globala eta IL proiekzio espezifikoa mvHPCn eta pvHPCn aztertu zen arratoi guztietan. Desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko kaiola taldeen artean Fos adierazpenean mvHPC-n (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) desagertze ona izan da (Mean Rank Diff. = 13,29). , p = 0,031), baina ez desagerpen eskasak (Batezbesteko Rank Diff. = 6,857, p > 0,999) ezta beldurra gogoratzeko (Mean Rank Diff. = 8,000, p = 0,864) taldeek Fos adierazpen gehiago erakutsi dute etxeko kaiola taldeak baino (Irudia. 7A). Desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko kaiola taldeen artean Fos adierazpenean mvHPC-n (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) desagertze ona izan da (Mean Rank Diff. = 13,29). , p = 0,031), baina ez desagerpen eskasak (Batezbesteko Rank Diff. = 6,857, p > 0,999) ezta beldurra gogoratzeko (Mean Rank Diff. = 8,000, p = 0,864) taldeek Fos adierazpen gehiago erakutsi dute etxeko kaiola taldeak baino (Irudia. 7A). Gehiago irakurri, хорошим угасанием угасанием, отзывом угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдальная разница в экспрессии Fos в MVHPC (X2 (3) = 8.056, p = 0,045), Так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29), or = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в средняя ранговая разница едняя ранговая разница = 8.000, p = 0.864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). Desberdintasun handia zegoen mvHPC Fos adierazpenean desagertze ona, desagerpen eskasa, beldurra gogoratzea eta etxeko zelulen artean (X2(3) = 8,056, p = 0,045), beraz, desagerpen ona (batez besteko aldea = 13,29), p = 0,031), baina ez desagertzeko talde eskasean (batez besteko maila-aldea = 6,857, p > 0,999) ezta beldurra gogoratzeko taldean (batez besteko maila-aldea = 8,000, p = 0,864) Fos adierazpena etxeko taldean baino handiagoa izan da.zelula (7A. irudia). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显存在显着在显着 3,80 弈 2,0 p 45），因此良好消退（平均秩差= 13,29） ，p = 0,031 ），但无论是弱消退（平均秩差= 6.857，p > 0.999）还是恐惧回忆（平均秩差= 8.999）还是恐惧回忆（平均秩差=8.，秩廉（ 0.90.都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）。 mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 存在 存在 嘾睼 显在 显2 56, p = 0,045） ， 良好 （（平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031 ） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还是 恐惧 （秩坷 幧 坷0. p = 0,864） 组都 出 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图。。。。 ））））））））））））））））））））））））））））））) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страхание страхание страхание страханание страхание страханание страхание между группами «хорошо». ессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) eta, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница разница = разница 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воминя средняя разница рангов = 6,857 разница рангов = 8.000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Fos adierazpenerako mvHPC-n ona, txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean alde esanguratsua zegoen (X2(3) = 8.056, p = 0.045) eta, beraz, erregresio ona (batez besteko aldea = 13.29), p = 0,031), baina desagerpen ahula zuten taldeek (batez besteko maila-aldea = 6,857, p > 0,999) eta beldur-memoriak (batez besteko maila-aldea = 8,000, p = 0,864) Fos adierazpen handiagoa erakutsi zuten etxeko kaiolako taldeak baino (2. irudia).7A).Hala ere, ez zegoen alde nabarmenik (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (7C irudia).Horrez gain, ez zegoen Fos adierazpen globalaren arteko korrelazio esanguratsurik mvHPCn (rs = -0.233, p = 0.309) (7B Irudia) eta Fos adierazpenaren artean mvHPC aferente IL zeluletan (rs = 0.056, p = 0.810) (7D Irudia).eta desagerpenari buruzko txostena.Gainera, ez zen desberdintasun handirik egon desagertze ona, desagerpen txarra, beldurra gogoratzea eta etxeko zelula taldeen artean Fos adierazpenean pvHPC-n (X2 (3) = 3.623, p = 0.353) (7E irudia), eta ez zegoen desberdintasun esanguratsurik.Fos adierazpenaren erregresio onaren aldea pvHPC IL zelula aferenteetan, erregresio eskasa, beldur-memoria eta etxeko zelula taldeetan (X2(3)=3.871, p=0.276) (7G. irudia).Azkenik, ez zen korrelazio esanguratsurik egon pvHPC global Fos adierazpenaren (rs = -0.127, p = 0.584) (7F irudia) eta IL-aferentearen pvHPC zeluletan Fos adierazpenaren (rs = 0.176, p = 0.447) eta desagerpen-gogoratzearen (7F irudia). ).7H).
Fos adierazpena goratu egiten da arratoien hipokanpo bentralean, memoria ona desagertzea adierazten du.(A) Ondo desagertutako taldeak, baina ez beste taldeek, Fos-en adierazpen handiagoa erakutsi zuten mvHPCn etxeko zelula taldearekin alderatuta.(B) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren eta desagerpen-gogoratzearen artean mvPHCn.(C) Fos adierazpena mvHPC IL zelula aferenteetan ez zen taldeen artean nabarmen ezberdintzen.(D) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren IL aferenteetan eta mvHPC-n desagertze-gogoratzearen artean.(E) Ez zegoen desberdintasun esanguratsurik taldeen artean Fos adierazpenean pvHPCn.(F) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren eta desagertze-gogoratzearen artean pvHPCn.(G) Fos adierazpena pVHPC IL zelula aferenteetan ez zen taldeen artean nabarmen ezberdintzen.(H) Ez zen korrelazio esanguratsurik egon Fos adierazpenaren IL aferenteetan eta pvHPC-n desagertze-gogoratzearen artean.Errore-barrak batez bestekoaren desbideratze estandarra adierazten dute. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.Eskualde guztietarako gure lehen analisiak hiru mailatan konparazioa erakutsi zuen anteroposterior ardatzean, nahiz eta anteroposterior ardatzean erori zen eskualde bakoitza ere aztertu genuen.Analisi horien emaitzak 1. taulan azaltzen dira.
Hemen probatu genuen desagertzearen oroimenean dauden desberdintasun indibidualak beheko kortex linbikoko jarduera aferentearen eredu desberdinetan islatuko ote ziren.Horretarako, Fos-en jarduera ebaluatu dugu IL-ren proiekzioetan, desagerpenaren errepikapenaren ondoren, talamo parabentrikularra, klaustroa, amigdal basolaterala eta hipokanpo bentrala.IL-proiektatzen duten zeluletan, PVTren atzeko eskualdean jarduera handiagoa aurkitu dugu iraungitze-gogorapen ona erakusten zuten arratoietan, iraungitze eskasa duten arratoiekin alderatuta.IL aferenteetan ez zegoen desberdintasunik nukleo klabikulartik, hipokanpo bentraletik edo amigdal basolateraletik.IL-proiektatzen duten zelulez gain, neurona-jarduera areagotu egin da arratoiaren klaustroaren eta hipokanpo bentraleko eremu hautatuetan bereizmen onarekin.Gure emaitzek adierazten dute desagertze-memoria arrakastatsua PVT proiekzio espezifikoen bidez antolatzen dela klaustroan eta hipokanpo bentralean IL eta IL-helburu ez diren zeluletan.
PVT IL iragarpena aktiboa zela desagertze-gogorapen ona erakutsi zuten arratoietan, eta hori bat dator azken ikerketa batekin, PVT desagertzeko gogorarazteko beharrezkoa dela.Azterketa honek ez zuen azpieskualdearen berariazko manipulaziorik erabili, baina erakutsi zuen bai alboko amigdala zentraleko PVT proiekzioak bai PVTren IL proiekzioak behar zirela desagerpena erreproduzitzeko.Gure emaitzek adierazten dute, IL-PVT-CeL kateaz gain, IL-en post-PVT sarrera bat ere beharrezkoa izan daitekeela gogorarazteko.Horrela, bi IL konexio eferenteak zein aferenteak desagertzearen erreprodukzioan parte hartzen dutela ikusten da.Hurrengo urrats garrantzitsu bat pPVT-k zirkuitu neuronalen mailan desagertzearen erreprodukzioa seinaleztatzea zerk eragiten duen zehaztea da.IL-rekin erlazioaz gain, aurreko hodi-jarraipen-ikerketek31,32 pPVT-k gris periakudukto ventralaren (vPAG) sarrera jasotzen duela frogatu dute, desagerpenaren ikaskuntzarekin lotuta dagoena33,34,35,36.Desagertze-gogorapenean vPAG-ek duen eginkizuna finkatu ez bada ere, vPAG-ek pPVT-ren iragarpena hautagai erakargarria da haien dentsitateagatik eta bi eskualdeek beldurra desagertzearen aurreko frogak sortzen duten parte-hartzeagatik.
Gure PVT emaitzen beste alderdi garrantzitsu bat beren aurreko-atzeko ardatzean espezializatuta daudela da.Harrigarria bada ere, IL-n PVT proiekzioaren jarduera neuronala kontrako jokabide-egoerarekin erlazionatzen da, hala nola IL-en aurre-PVT proiekzio-jarduera beldurra gogoratzearekin lotzen da, eta pPVT proiekzioa aktiboa den bitartean, oroimen arrakastatsua desagerrarazi ondoren (hau da, beldurra).PVTren barruko heterogeneotasun funtzional hori ez da harritzekoa aurreko lana ikusita [37an eztabaidatua].PVTren banaketa funtzionalaren adibide deigarri bat agertu da duela gutxi PVTko zelula mota espezifikoen propietateak ezaugarritu dituen ikerketa batean.Ikerketa honek erakusten du DRD2 adierazten duten dopamina zelulak pPVTn adierazten direla nagusiki, aurreko gorputz-adarraren kortexak inerbatzen dituztela eta estimulu gaitzesgarriei erantzuten dietela.Bigarren zelulen populazioa aPVT-n adierazten da nagusiki eta kitzikapen fisiologiko baxuko egoera batera igarotzea markatzen du eta beheko gorputz-adarretako kortexak inerbatzen ditu.Gure emaitzak nekez sartzen dira eredu honetan, IL-proiektatzen duten aPVT zelulak aktiboak baitira beldurra gogoratzean, pPVT proiekzioak aktiboak diren bitartean eta animaliek beldur maila baxua erakusten dute.Gutxienez bi azalpen posible daude itxurazko desadostasunarengatik.Lehenik eta behin, identifikatutako zelula motak ez daude TVVren aurreko-atzealdeko gune batean soilik kokatzen.Beraz, desagertze-memoria ona duten arratoietan IL-proiektatzen duten pPVT zelula aktiboak aPVTn detektatzeko eta kitzikapen baxuko egoerarako trantsizioa adierazten duten zelula-klase batekoak izan daitezke.Gauza bera gerta daiteke beldurraren memoriaren ondoren aktibatutako aPVT-ko IL-proiektatzen duten zelulekin.Bigarrenik, aurreko trazatze-ikerketek IL3 proiektatzen duten pPVT-en presentzia identifikatu dute, nahiz eta batzuk DRD2 duten zeluletatik eratorritakoak diruditen, beste zelula-mota batzuk IL-era proiekta daitezke eta itzaltzeko ugalketa arrakastatsuan aktibatu daitezke.
Ikerketa honen helburua desagertzeko fenotipo desberdinak dituzten arratoien arteko desberdintasunak identifikatzea bazen ere, esperimentu hauek beldurraren memoriaren mekanismoekin lotutako datu berriak ere agerian utzi zituzten.Interesgarria da aurreko CLAn Fos jarduera areagotua aurkitu genuen beldur-memoria duten arratoietan.
Klabikula komunikazio kortikalaren erdigune gisa kokatzen da eta zentzumen integraziotik arreta eta lora bitarteko prozesuetan parte hartzen du40,41,42,43.Ebidentzia mugatua dago klaustroak beldurra baldintzatzean edo beldurraren adierazpenean nola parte hartzen duen, hala ere, lehenagoko ikerketek erakutsi dute testuinguruko beldurraren adierazpenak Fos jardueran parte hartzen duela klaustroan.Berriki jakinarazi da kortex entorrinaleko atresiaren proiekzioen inhibizioak beldurra testuinguruaren baldintzatzean epe luzeko memoriaren eraketa kaltetzen duela, nahiz eta haien beldurra adierazteko beharra probatu ez den.Azterketa berean, Fos aktibazio handiagoa ikusi zen animaliak ingurune berri batean jasan zituztenean ingurune ezagun batean jasandako saguekin alderatuta.Hori kontuan izanda, hemen jakinarazi dugun CLA aktibazioa probak zehar kamera berriarekiko esposizioagatik izan daiteke, gogoratzeko beldurra baino.Beldurraren eta egoeraren prozesamenduan blokeoen funtzioa zehaztasunez karakterizatzeko, etorkizuneko ikerketek zuzendutako blokeoen manipulazioa erabili beharko lukete.
Aurreko lanek PVT beldurraren oroimenaren adierazpenarekin lotuta dagoela erakutsi duten arren,45,46,47 ez genuen Fos adierazpen totalaren aldaketarik ikusi arratoietan, baldintzatu eta 48 ordura beldurra gogoratu zutenean.Desberdintasun hau hainbat faktorek azal dezakete, besteak beste, aurreko lanaren probak baldintzatzea gertatu zen testuinguru berean seinale diskretuen beldurra, gure esperimentuan, berriz, probak gela berri batean egin ziren.Horrez gain, gure animaliei eutanasia egin genien proba egin eta 60 minutura, aurreko lanak 90 minutuko denbora-puntua erabiltzen zuen bitartean.Azkenik, aurreko ikerketetan, animaliek gosearekin erantzuteko gela batean egin zen proba, gure lanean, berriz, arratoiak gosearen erantzunik gabe probatu ziren.Horrek nolabaiteko inhibizio baldintzatua ahalbidetzen badu ere, bada animaliek janaria lortzeko presioa inhibitzea ahalbidetzen duten bitartean beldurraren seinaleak diren ala ez probatzen duten bitartean motibazio gatazka sortzen duela (hau da, beldurra versus saria), eta hori funtsezko faktore estimulatzailea da.partaidetza PVT48, 49. .
Ezagutzen da amigdala basolateralak beldurra desagertzeko orduan parte hartzen duela50,51 eta frogak daude IL-ren BLA proiekzioak ere prozesu horretan parte hartzen duela23.Hala ere, ez dago argi BLA eta bere loturak desagertzearen bueltan parte hartzen duten.Irudi-ikerketek23,28 animalietan BLA jarduera areagotu egin dute oroitzapen lausotuak gogoratuz.Gure aurreko lanak desagertzeko arratoi onen eta txarren artean BLA aktibazioan desberdintasunik ez zuen erakutsi arren, hemen gure emaitzek iradokitzen dute desagertzearen gogoratzeak, oro har, ez duela BLA ILaren iragarpenean eragiten BLA edo aktibazioan.Gure aurkikuntzekin bat etorrita, zirkuituen manipulazioaren ikerketek BLAren IL-en sarrerak desagertzeko ikaskuntzarako garrantzitsuak direla iradokitzen duten arren, ez dira beharrezkoak iraungipena gogoratzeko.Hala ere, BLAren eginkizuna ezin da guztiz alde batera utzi, azken frogak iradokitzen baitute BLAko zelula mota batzuk desagertzeko ugaltzeko beharrezkoak direla.
Nabarmentzekoa, beldurra gogoratzeak ez zuen Fos aktibazioa eragin BLAn, aurreko lesioen, drogaren eta irudien ikerketek eremu hori inplikatu baitzuten beldurren adierazpenean eta/edo beldurra berreskuratu ondoren berregokitzean54,55,56,57.Hemen aurkezten diren datuek amigdalaren azpinukleo basala eta albokoa konbinatzen dituzte, eta aurreko datuek iradokitzen dute beldurraren adierazpenak Fos jarduera bultzatzen duela alboko nukleoaren dortsalean.Azpiko eta alboko datuak banan-banan aztertu genituen, baina ez zen alderik egon bi kasuetan (datuak ez dira erakusten) eta bi eremuak kolapsatu egin ziren hemen aurkezten ditugun datuetan.Ez ditugu alboko amigdalaren azpieskualdeak aztertu, beraz, eremu honetako aldaketa zehatzak ezkutatu daitezke.BLAn Fos-en jardueran aldaketarik ez izateko beste aukera bat beldurraren oroitzapenen denborak baldintzatzearekin alderatuta dago.Aurreko lan batzuek erakutsi dute BLAren ekarpena beldurraren adierazpenari denborarekin jaisten dela baldintzatu eta gero, hala nola, adierazpena BLAren menpekoa da baldintzatu ondoren 24 orduetan baina independentea 7 egunetan (erref. 45 baina ikus 58).Entrenamenduaren ondoren 48 ordura gertatu zen, eta une honetan Fos jardueran aldaketarik ez izateak BLAren parte-hartzean beldurraren adierazpenean denboraren araberako aldaketak islatzen ditu.
Azkenik, desagertzeko memoria arrakastatsua hipokanpo bentralarekin lotuta dagoela frogatzen dugu."Bitarteko" vHPC-en ezaugarria da, eredu bera ez baitzen atzeko eskualdean ikusi.Aurreko lanarekin bat, ez dugu Fos aktibazioan aldaketarik aurkitu vHPC IL aferenteetan.Ebidentzia nabarmena dago vHPC28,60,61 beldurra eguneratzeko beharrezkoa dela CS desagertzea gertatzen den testuingurutik kanpo gertatzen denean, eta hori, gutxienez, neurri batean IL13-n vHPCren sarreraren araberakoa dela.Aurreko emaitza hauetan oinarrituta, desagertze eskasa vHPCren aurreikusitako IL jarduera handitzearekin lotzea espero genuke.Hala ere, ez zen horrela izan Fos-en jardueran ez baitzegoen desberdintasunik IL-proiektatutako vHPC atzerakoietan edo vHPCetan etiketarik gabeko zeluletan.Horrek iradokitzen du desagertzearen testuinguruan desagertzea gogoratzeko ezintasunak berritzeko beldurra baino mekanismo ezberdin bat eragin dezakeela.
Garrantzitsua da berezko diseinu eta analisiaren muga batzuk eta gure ondorioetan nola eragiten duten kontuan hartzea.Lehenik eta behin, animaliak goiko eta beheko herenetan banatu genituen, eta saguak "onak" eta "txarra"tan banatu genituen, desagertze-gogoratzearen puntuazioetan oinarrituta.Hori egiten da banaketaren erditik animaliak talde bereizietan banatzen dituzten talde-eskemak saihesteko, edo banaketaren erditik animaliak baztertzen dituzten talde-eskemak saihesteko, hala nola, medianaren bidez bereiztea edo arratoien goiko eta beheko herenak alderatzea. .egoera hori saihestu nahi dugu, erdiko zatiketak ez duelako islatzen saiatzen ari garen traumei giza erantzunen aldakortasuna.Horrez gain, arratoien goiko eta beheko herenak alderatzeak antzeko tamainako taldeak konparatzeko aukera ematen duen arren, ikuspegi honek banaketaren erdian dauden animaliak baztertzen ditu eta ez du zehaztasunez islatzen lesioekiko erreakzioen aldakortasuna.Gure metodoak bariantza heterogeneoarekin eta lagin-tamaina desberdina duten taldeak alderatuz arazoak izan ditzakeen arren, metodo alternatiboek baino hobeto imitatzen saiatzen ari garena jasotzen du.
Hemen aurkezten diren emaitzek hobeto ulertzen laguntzen digute nola islatzen diren desagerpenaren oroimenaren banakako desberdintasunak zirkuitu neuronalen jardueraren desberdintasunetan.Gure aurkikuntzak garrantzitsuak izan daitezke trauma osteko estresaren nahastearekin, gehiegizko beldurrarekin eta beldur-erantzunak ezabatzeko ezintasunarekin lotuta dagoela ezagutzen dena.Erakusten dugu desagertze-gogorapenean dauden desberdintasunak IL-n proiektatzen diren jarduera neural intrintseko eta kanpoko desberdintasunekin lotuta daudela.Desberdintasun hauek anteroposterior ardatzean zehar eskualde ezberdinetan banatu ziren, eta, gainera, azpieskualde mailan garunaren funtzioa ebaluatzearen garrantzia nabarmendu zuten.Gaur egungo metodoaren desabantailen artean ikerketaren garrantzia eta karraskari arrak arreta jartzea daude.Etorkizuneko ikerketek karraskari emeen desagerpenaren ikaskuntzaren azpian dauden mekanismo neurobiologikoak zehaztu beharko lituzkete eta kausazko ondorioak ateratzeko metodoak erabili behar dituzte.
Oraingo ikerketan erabilitako eta/edo aztertutako datu-multzoak dagozkien egileengandik eskura daitezke, arrazoizko eskaera eginda.
Pavlov IP Conditioning: garun-azalaren jarduera fisiologikoaren azterketa.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Trauma osteko erreakzioen tratamendurako ikaskuntza-printzipioak aplikatuz. Rothbaum, BO, & Davis, M. Trauma osteko erreakzioen tratamendurako ikaskuntza-printzipioak aplikatuz.Rotbaum BO eta Davis M. Trauma osteko erreakzioen tratamendurako ikaskuntza-printzipioak aplikatzea.Rotbaum BO eta Davis M. Ikaskuntza-printzipioen aplikazioa erreakzio post-traumatikoen tratamenduan.instalatu.New Yorkeko Unibertsitatea.zientzia.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Esposizio-terapiaren berrikuspena: PTSD tratamendurako urrezko estandarra. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Esposizio-terapiaren berrikuspena: PTSD tratamendurako urrezko estandarra.Rauch SA, Eftekhari A. eta Ruzek DI Esposizio-terapiaren berrikuspena: estres osteko nahastearen urrezko tratamendua. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Esposizio-terapiaren berrikuspena: PTSD tratamendurako urrezko estandarra.Rauch, SA, Eftekhari, A. eta Ruzek, DI Esposizio-terapiaren berrikuspena: estres osteko nahastearen urrezko tratamendua.J. Errehabilitazioa.urtegiaren garapena 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Esposizio luzeko terapia: iragana, oraina eta etorkizuna.Antsietatearen errepresioa 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Millard jauna et al.Estres post-traumatikoan memoria galtzearen kausa existentzialak eta eskuratuak: ikerketa biki baten aurkikuntzak.J. Psikiatra.biltegiratze depositua.42(7), 515-520 (2008).
Millard jauna et al.Trauma-ondoko estresaren nahastean desagertutako oroitzapenak gogoratzeko ezintasunaren oinarri neurobiologikoa.biologia.Psikologia.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Beldurraren desberdintasunak indibidualak: beldurraren erreaktibitatea isolatzea eta beldurra berreskuratzeko fenotipoak. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Beldurraren desberdintasunak indibidualak: beldurraren erreaktibitatea isolatzea eta beldurra berreskuratzeko fenotipoak.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. eta LeDoux, JE Beldurraren arteko diferentzia indibidualak: beldurraren erreaktibotasunaren eta beldurraren berrezarpenaren fenotipoak bereiztea. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Beldurraren arteko desberdintasun indibidualak: beldurraren erantzunaren isolamendua eta beldurra berreskuratzeko taula.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. eta LeDoux, JE Beldurraren arteko desberdintasun indibidualak: beldurraren erantzunen isolamendua eta beldurraren berreskurapenaren fenotipoa.J. Trauma.presioa 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Arratoien ikaragarrizko erantzun akustikoak beldurra desagertzeko norbanakoen arteko aldakuntza aurreikusten du. Russo, AS & Parsons, RG Arratoien ikaragarrizko erantzun akustikoak beldurra desagertzeko norbanakoen arteko aldakuntza aurreikusten du.Russo, AS eta Parsons, RG Arratoien ikaragarrizko erantzun akustikoak beldurra desagertzeko banakako desberdintasunak aurreikusten ditu. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS eta Parsons, RGRusso, AS eta Parsons, RG Arratoien ikaragarrizko erantzun akustikoak beldurra desagertzeko banakako desberdintasunak aurreikusten ditu.Neurobiologia.aztertu.Memoria.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Beldurraren desagerpena gogoratzeko banakako aldakortasuna mitogenoek aktibatutako proteina kinasaren fosforilazioarekin lotuta dago kortex infralinbikoan. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Beldurraren desagerpena gogoratzeko banakako aldakortasuna mitogenoek aktibatutako proteina kinasaren fosforilazioarekin lotuta dago kortex infralinbikoan.Russo, AS, Lee, J. eta Parsons, RG Beldurra gogoratzeko desagerpenaren aldakortasun indibiduala mitogenoek aktibatutako proteina kinasaren fosforilazioarekin lotuta dago kortex infralinbikoan. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Beldurraren desagerpena gogoratzea 美裯中丝裂原活化筒能激酶的fosforifikazio periferikoko desberdintasun indibidualekin lotuta dago.Russo, AS, Lee, J. eta Parsons, RG Oroitzean beldurra desagertzeko banakako desberdintasunak mitogenoek aktibatutako proteina kinasen fosforilazioarekin lotuta daude beheko gorputz-adarraren kortexean.Psikofarmakologia 236 (7), 2039–2048 (2019).